光學顯微鏡簡介
概述
光學顯微鏡是用于放大研究樣本的儀器。光學顯微鏡是一種非常有價值的分析工具，它有可能使科研人員能夠以原始尺寸的1000倍查看物體。正如您將看到的那樣，光學顯微鏡通過一些非常基本的原理進行操作，但是在可視化實驗室中的標本方面幾乎具有無限的應用。
光學顯微鏡的基本原理
顧名思義，光學顯微鏡需要一個光源，該光源產生的光可以通過聚光鏡聚焦到樣品上。
照射標本的光到達稱為物鏡的透鏡，該透鏡會產生放大的圖像，該圖像被倒置或上下顛倒。目鏡或目鏡進一步放大了眼睛隨后接收到的圖像。可以將其他光學元件引入光路以校正圖像，以便眼睛以正確的方向看到它。像您在這里看到的那樣使用多個透鏡的顯微鏡稱為復合顯微鏡。
在復合顯微鏡中，總放大倍數是通過將物鏡的放大倍數與目鏡或目鏡的放大倍數相乘得出的。使用40倍物鏡和10倍目鏡，總放大倍數為400倍。
為了幫助估計顯微鏡下物體的大小，可以使用目鏡標線片（在圖像上投影的標尺）。與在較低放大倍數下觀察時相比，在較高放大倍數下，目鏡掩模版中的刻度線將代表較小的距離。
除放大倍率外，顯微鏡光學的另一個方面是分辨率。分辨率是指示波器下兩個對象之間的zui短可分辨距離。隨著這些字符的頭部越來越清晰，并且分辨率提高，它們之間的zui短可觀察距離也減小了。
光學顯微鏡的主要組件
光學顯微鏡的主要組件包括物鏡，目鏡，樣品臺和樣品架，光源，視場光闌，聚光鏡和光圈以及粗和細聚焦旋鈕。
物鏡負責顯微鏡的大部分放大和分辨率。它們安裝在旋轉的鏡架上，以使隨著物鏡的改變，焦平面保持不變-這種特性稱為準焦。可以用放大倍率，數值孔徑或NA，所需的浸沒介質類型，安裝樣品時應使用的蓋玻片厚度以及工作距離（從透鏡元件的**到透鏡的距離）標記物鏡。樣品中的焦平面。
數值孔徑再次定義為NA，是顯微鏡物鏡可收集光線的程度的量度。高NA物鏡允許傾斜角度的光通過，而低NA物鏡則需要更多的直接光。給定光的波長，可以從數值孔徑計算出物鏡的分辨率。
光源，視場光闌，光圈和聚光鏡均負責產生光并將其傳輸到樣品。
光源通常是可調節以控制光強度的低壓鹵素燈泡。
然后，光線穿過各種濾光片并進入視場光闌，該視場光闌控制要照亮的樣本區域。
接下來是聚光鏡，它將明亮的光線聚焦在樣品上，樣品周圍的照明錐由聚光鏡控制，必須根據所使用的物鏡進行調整。
操作光學顯微鏡
要開始使用光學顯微鏡，請將包含感興趣區域的樣品放在顯微鏡載物臺上，將其直接放在物鏡上居中，然后使用載物臺夾將其固定到位。
接下來，打開光源并切換到zui低功率的物鏡。
接下來，通過使用粗調旋鈕的初始調整將低倍物鏡在z方向上移動來聚焦，然后旋轉微調旋鈕以使物體清晰聚焦。注意不要用物鏡撞擊幻燈片或載物臺，因為這可能會損壞鏡頭。
然后，一邊調節旋鈕一邊在x和y方向上移動滑塊，一邊通過目鏡觀察來找到感興趣的區域。當您從低倍放大到高倍放大時，視野的大小將急劇減小。
在移至較高功率之前，將zui低功率的物鏡放在感興趣的區域上會大大增加找到所需標本的機會。
一旦樣品被置于低功率并聚焦，就移至將用于采集圖像的更高功率的物鏡。
shou先調整視場光闌，使光闌本身位于視場之外，從而優化照明質量。
接下來，調節聚光鏡的光闌，使其設置與所使用物鏡的數值孔徑相匹配。
zui后，再次調整焦點。這次僅使用微調旋鈕。
現在，您可以為標本拍照了。
應用
光學顯微鏡具有可視化各種標本的潛力，并且復合顯微鏡的各種配置適用于許多不同的應用。
在這里，您會看到研究人員準備在手術顯微鏡下工作。這些顯微鏡通常懸掛在可移動的臂上并且是立體的，這意味著它們允許光傳遞給觀察者以及安裝在顯微鏡上的照相機。該手術顯微鏡正用于小鼠的腎臟移植手術。
在此剪輯中，您將看到研究人員通過解剖顯微鏡觀察，同時挑選出理想的果蠅幼蟲進行進一步解剖，以暴露體壁肌肉，從而可以研究神經肌肉接頭。
在這里，您可以看到倒置復合顯微鏡，該顯微鏡的物鏡在鏡臺下方，正在準備進行顯微注射技術。該過程稱為體細胞核轉移，是產生轉基因動物和產生克隆的重要方法。
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